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GB/T 24800.3-2009 化妆品中螺内酯、过氧苯甲酰和维甲酸的测定 高效液相色谱法


4 仪器


4.1 液相色谱仪,配有二极管阵列检测器。

4.2 微量进样器,10μL,

4.3 超声波清洗器。

4.4 离心机,大于5 000 r/min,

4.5 溶剂过滤器和0.45μm有机过滤膜。

4.6 具塞比色管,10 mL。

5 测定步骤

5.1 样品处理

      称取化妆品试样约0.2g,精确到0.001g,于10 mL具塞比色管中,加人8mL甲醇,在超声波清洗器中超声振荡20min,冷却后用甲醇稀释至刻度,混匀。取部分溶液放人离心管中,在离心机上于 5000r/min离心20min,离心后的上清液经0.45μm有机滤膜过滤,滤液待测定用。

5.2 测定

5.2.1 色谱条件

5.2.1.1 色谱柱:Kromasil C18柱(250 mm×4.6mm内径,5μm);

5.2.1.2 流动相:A:甲醇,B:0.025mol/L磷酸二氢钠溶液(pH 6.5)(3.9),梯度洗脱条件见表1。 

1方法的梯度洗脱条件

 

5.2.1.3 流速:1.0 mL/min;

5.2.1.4 柱温:25℃;

5.2.1.5 检测波长:0~9.50 min,240nm,9. 51 min~13 min,335nm;

5.2.1.6 进样量:10 μL。

5.2.2 标准工作曲线绘制

      分别移取一系列浓度为1 mg/L、2 mg/L、5 mg/L、10 mg/L、 20 mg/L、 50 mg/L、100 mg/L、200 mg/L的混合标准工作溶液,按色谱条件(5.2.1)进行测定,以色谱峰的峰面积为纵坐标,对应的溶液浓度为横坐标作图,绘制标准工作曲线。

      标准物质色谱图参见附录A的图A.1。

5.2.3 试样测定

      用微量注射器准确吸取试样溶液(5. 1)注入液相色谱仪,按色谱条件(5.2.1)进行测定,记录色谱峰的保留时间和峰面积,由色谱峰的峰面积可从标准曲线上求出相应的被测物浓度。样品溶液中的被测物的响应值均应在仪器测定的线性范围之内。被测物含量高的试样可取适量试样溶液用流动相稀释后进行测定。

5.2.4 定性确认

      液相色谱仪对样品进行定性测定,进行样品测定时,如果检出螺内醋、过氧苯甲酞或维甲酸的色谱峰的保留时间与标准品相一致,并且在扣除背景后的样品色谱图中,该物质的紫外吸收图谱与标准品的紫外吸收图谱相一致,则可初步判断样品中存在螺内酯、过氧苯甲酰或维甲酸。必要时,阳性样品需

 

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