1 范围
本标准规定了化妆品急性毒性的角质细胞试验方法的基本原理、试验准备、试验过程、结果和报告。
本标准适用于化妆品原料和成品细胞毒性作用的筛选和检测。
本标准适用于预测啮齿类动物急性经口毒性试验的开始剂量，可作为毒性试验的一部分，结合其他试验用于受试物质毒性的整体评价。
本标准也可作为制药、农业和工业受试物质，食品添加剂和接触材料，以及其他污染物的毒性测定参考方法。
2 术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
2.1
希尔函数 hill function
关于受试物浓度与反应关系的包含4个变量的S型对数数学模型。
Y是反应，x是剂量（或浓度）对数，Bottom是最小反应，Top是最大反应，logIC5。是反应剂量或浓度在最高（Top）和最低（Bottom）中间时的对数，HiliSlope表示曲线的倾斜度。
2.2
人角质细胞human keratinocyte, HKC
角质细胞是构成人体表皮的主体细胞，是一种可合成角蛋白的细胞，体内呈分层生长排列；体外分离的角质细胞来源于包皮或胸腹部等处皮肤组织。
2.3
20％致死浓度IC20。
在一定条件下使HKC细胞生长和活力抑制20％的受试物浓度。
2.4
半数致死浓度IC50
在一定条件下使HKC细胞生长和活力抑制50％的受试物浓度。
2.5
80％致死浓度IC80
在一定条件下使HKC细胞生长和活力抑制80％的受试物浓度。
3 基本原理
本标准采用正常人角质细胞，应用中性红摄取（NRU）细胞毒性试验检测受试物的细胞毒性。体外培养的正常哺乳动物细胞不断地分裂增生，毒性物质不论其作用位点和机制如何，都会干扰细胞的分裂增殖过程，导致细胞生长速率下降和数量减少。培养中的正常细胞经受试物暴露后，细胞毒性表现为浓度依赖性的中性红摄取降低，据此可以得出有关细胞完整性受损和生长抑制等作用的信息。中性红 (NR）是一种弱的阳离子染料，极易以非离子扩散方式穿透细胞膜并在细胞溶酶体内聚集。活细胞具有结合和连接中性红染料的特点。外源性物质作用引起的细胞膜表面的改变或溶酶体膜敏感性的改变，
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