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SN/T 3084.2-2014 进出口化妆品眼刺激性试验 角膜细胞试验方法

1 范围

      SN/T 3084的本部分规定了化妆品眼刺激性角膜细胞试验方法。

      本部分适用于化妆品原料和成品眼刺激性体外筛选试验。

      本部分适用于部分化妆品使用的表面活性剂的筛选测试。

本部分可作为眼刺激性动物试验的替代方法之一。可以结合其他眼刺激替代试验,对眼刺激效应进行综合评价。

      本部分可作为其他领域眼刺激体外测试的参考方法。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

      SN/T 2285 化妆品体外替代试验实验室规范

3 术语和定义

      下列术语和定义适用于本文件。
3.1

      眼刺激性 eye irritation

      眼球表面接触受试样品后产生的可逆性炎性变化。

3.2

      SIRC细胞系 statens seruminstitut rabbit cornea cell line

      来源于兔眼角膜组织的成纤维细胞系。

3.3

      STE试验 short time exposure test

      采用SIRC细胞进行的短时间暴露试验,本部分指5 min暴露试验。

4 原理
      
本试验采用来源于眼刺激靶器官的SIRC细胞系,将样本干预细胞5 min,然后去除。采用CCK-8 细胞毒性测试法(cell counting kit-8 cytotoxicity test),使千预后的细胞与CCK-8试剂反应,活细胞线粒体中的脱氢酶会将CCK-8试剂还原成橙黄色的甲攒染料,活细胞越多,被还原成的染料越多,颜色深浅与细胞数目呈线性关系。通过测定波长450 nm时的吸光度值,计算细胞的生存率,判断样品的眼刺激性。本部分为STE短时暴露试验,适用于不同溶解性状的样本。

 

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