本标准适用于地表水、废水中总大肠菌群和粪大肠菌群的快速测定。
本方法的检出限为20 MPN/L。
2 术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
2.1 总大肠菌群 total col iforms
37℃培养，24h内能发酵乳糖产酸产气的需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性无芽抱杆菌。
2.2 粪大肠菌群fecal col iforms
44.5℃培养，24h内能发酵乳糖产酸产气的需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性无芽抱杆菌。
2.3 最大可能数most probable number, MPN
微生物检验常用发酵法，又称稀释法，是一种利用统计学原理定量检测微生物浓度的方法。它根据不同稀释度一定体积样品中被检微生物存在与否的频率，查表求得样品中微生物的浓度，与直接报告菌落数的平板计数法不同，它最终报告的是样品中最有可能存在的目标微生物浓度，这个以最大可能存在的浓度，就被称为最大可能数（most probable number,缩写为MPN)。
3 方法原理
按MPN法，将一定量的水样以无菌操作的方式接种到吸附有适量指示剂（溴甲酚紫和2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑即TTC）以及乳糖等营养成分的无菌滤纸上，在特定的温度（37℃或44.5℃）培养24 h，当细菌生长繁殖时，产酸使pH值降低，溴甲酚紫指示剂由紫色变黄色，同时，产气过程相应的脱氢酶在适宜的pH范围内，催化底物脱氢还原TTC形成红色的不溶性三苯甲臜(TTF)，即可在产酸后的黄色背景下显示出红色斑点（或红晕）。通过上述指示剂的颜色变化就可对是否产酸产气作出判断，从而确定是否有总大肠菌群或粪大肠菌群存在，再通过查MPN表就可得出相应总大肠菌群或粪大肠菌群的浓度值。
4 试剂和材料
除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯化学试剂。
4.1 市售水质总大肠菌群和粪大肠菌群测试纸片：10 ml水样量纸片、1ml水样量纸片按以下方法进行质量鉴定，达到要求后方可使用。
(1) 外层铝箔包装袋应密封完好，内包装聚丙烯塑膜袋无破损。
(2) 纸片外观应整洁无毛边，无损坏，呈均匀淡黄绿色，加去离子水或蒸馏水后呈紫色，无论加水与否，应无杂色斑点，无明显变形，表面平整。
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