本标准规定了大型真菌多样性观测的主要内容、技术要求和方法。
本标准适用于中华人民共和国范围内大型真菌多样性的观测。
本标准内容引用了下列文件或其中的条款。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用 于本标准。
GB/T 7714 文后参考文献著录规则
GB/T 8170 数值修约规则与极限数值的表示和判定
HJ 623 区域生物多样性评价标准
HJ 628 生物遗传资源采集技术规范（试行）
下列术语和定义适用于本标准。
3.1
真菌 fungi
指行吸收营养、具细胞壁、能产孢、无叶绿素、以有性或无性两种方式繁殖的真核有机体。
3.2
大型真菌 macrofungi
泛指所有能够形成肉眼可见的子实体的真菌。
3.3
盘菌 cup fungi
指有性阶段形成子囊盘的子囊菌，包括绝大多数肉眼可见的子囊菌，其子囊果为杯状、盘状、钟状、马鞍状、舌状、羊肚状等。
3.4
地下真菌 hypogeous fungi
指子实体整个生长过程都在地表以下的大型真菌，包括子囊菌和担子菌的部分种类。
3.5
外生菌根真菌 ectomycorrhizal fungi
指与木本植物根系形成外生菌根共生关系的一些大型真菌，绝大多数为担子菌，少数为子囊菌。
4.1 科学性原则
观测样地和观测对象应具有代表性，能全面反映观测区域大型真菌的整体状况；应采用 统一、标准化的观测方法，能观测到大型真菌群落和物种多样性的动态变化。
4.2 可操作性原则
观测方案应考虑所拥有的人力、资金和后勤保障等条件，确保观测工作切实可行。应采 用效率高、成本低的观测方法。
4.3 持续性原则
观测工作应满足生物多样性保护和管理的需要，并能对生物多样性保护和管理起到指导 及预警作用。观测样地、样线和样方一经确定，不得随意改动。
4.4 保护性原则
大型真菌对其所处生态系统的形成、演化和稳定发挥着重要作用，任何对大型真菌的破 坏行为都不可避免地给整个生态系统造成不良影响。应做到不破坏样地内部及周边的大型真 菌和其他物种及其生境，避免超出客观需要的频繁观测。
4.5 安全性原则
观测具有一定的野外工作特点。观测者应接受相关专业培训，做好防护措施。
5.1 观测准备
5.1.1 组建和培训观测队伍
成立观测小组，明确观测者的责任，对观测者进行培训，使观测者掌握野外观测方法、 物种识别知识和野外生存技巧。
5.1.2 收集资料
收集观测区域气候、地理和植被等自然环境的资料，掌握常见大型真菌和植物的分布及 识别知识，准备观测区域高分辨率地形图。
5.1.3 观测仪器和工具
包括长卷尺、标桩、采集袋、采集刀、数码相机、全球定位系统（GPS）定位仪、海拔 仪、观测记录表、记录笔、防蚊罩、防蚊药、大型真菌鉴定手册等。
5.2 观测对象
观测对象主要为具有重要经济、生态价值和受威胁的大型真菌。包括可食用、药用及有 毒的种类，与树木共生的外生菌根真菌，降解植物残体的腐生大型真菌，以及一些寄生于动 植物、依靠寄主营养的种类等。
5.3 样地设置
5.3.1 代表性样地法
在观测区域内，选取物种种类和数量均较为丰富的地点，但其观测结果不能准确反映整 个观测区域的情况，也不能用于统计分析。
5.3.2 随机抽样法
将观测区域划分为若干样地。每个样地内划分为许多固定面积的样方并编号，然后用 Fisher的随机数字表进行随机取样，通常采用不放回的方法。当样地地形复杂、到达取样地 点耗时较长、大型真菌分布不均匀等因素会对结果造成影响时，采用分层随机抽样法。
5.3.3 分层随机抽样法
根据生境类型、气候、海拔、土地利用类型或物种丰富度等因素进行分层。
5.4 野外采样
5.4.1 子实体显见的地生大型真菌采样
5.4.1.1 这种方法主要适用于地表子实体显见的大型真菌的抽样观测。
5.4.1.2 在所选的样地内设置若干条样线，样线不一定是直线。样线应覆盖样地内主要生境 类型，每种生境类型至少有 2 条样线，每条样线至少保持 50 m 距离，每条样线长度在 0.5～ 1 km。用 GPS 定位仪定位样线起点和终点坐标，在 1:100000 地图上标注样线。
5.4.1.3 沿着样线，每隔 20 m 设置一个半径 1.26 m、面积 5 m2 的圆形样方，使每种生境类型的样方数量达 50 个左右。样方内生境必须尽可能同质。用一定标志标明样方的位置。
统计所选样方中地表大型真菌的种类、个体数量（样方记录表参见附录 A）。对于无法鉴别种类的大型真菌，记录其新鲜时的特征，拍摄原生境中子实体的照片，采集少量子 实体，将其进行编号后，放入相应的标本袋内，带回室内鉴定并完善观测记录。样本采集按 HJ 628 的规定执行。
5.4.1.5 在进行样方采样时，应同时拍摄样方原生境照片，并详细记录采集日期、地点、海拔、生态特征（如着生基质、周围植被、共生生物等）、采集人等。
5.4.2 子实体较小种类的样方取样
5.4.2.1 这种方法主要适合于子实体较小种类的观测（如子囊菌中的一些盘菌等）。
5.4.2.2 样地每年至少抽样两次，一般在子实体发生季节的中间和末尾进行。样本采集按HJ 628 的规定执行。
5.4.2.3 在靠近 5.4.1 中大型真菌样方的附近建立样方。
5.4.2.4 以 0.56 m 为半径，建立 1 m2 的圆形样方，以 1 周内可完成抽样调查为标准，确定样方数目。
5.4.2.5 统计所选样方中子实体较小真菌的种类、个体数量，少量采集样方内各种该类真菌 物种子实体用于鉴定，操作方法同 5.4.1.4，同时按 5.4.1.5 记录相关信息。
5.4.3 木生大型真菌采样
5.4.3.1 按照 5.4.1.2 设置样线，沿着样线，每隔 20 m 设置一个半径 2.52 m、面积 20 m2 的圆形样方，使每种生境类型的样方数量达 50 个左右。
5.4.3.2 每个样方中用一彩色的塑料标牌标记并编号，在地图上标记其位置。样方内被调查 的圆木（立木和倒木）直径需超过 1 cm。
5.4.3.3 统计每个样方内生长的木生大型真菌种类和个体数（记录表参见附录 B），并记录其基物树木的种类、直径和长度。对于无法鉴别种类的大型真菌，操作方法同 5.4.1.4，同时按 5.4.1.5 记录相关信息。
5.4.4 濒危大型真菌采样
5.4.4.1 在所选样地内有濒危大型真菌分布的地块上，设置若干 10 m×10 m 的样方。
5.4.4.2 统计样方内濒危大型真菌的种类和个体数（记录表参见附录 C）。采集大小适中的个别子实体，对其称重，用于推测样方内该物种子实体的生物量，或通过以往年份采集子实 体样品重量推测其生物量。样本采集按 HJ 628 的规定执行。同时按 5.4.1.5 记录相关信息。
5.5 标品制备、保存和鉴定
5.5.1 大型真菌标本制备和保存
采集的标本应及时分离菌种或制作用于提取DNA 的组织块。标本用烘干箱在 40～45 ℃ 温度下及时烘干。含水量较多且个体较大标本烘干时需要剖开、切成薄片后烘干。烘干的标 本在自然条件下冷却至室温，置于-40℃以下的冰柜中冷冻，大多数标本通常冷冻 10～15 天，个别体积较大标本（如子实体直径或最大径超过 30 cm，或厚度超过 5 cm）的冷冻时间应延长至 20～30 天。冷冻后的标本保存在标本馆等适宜场所。
5.5.2 用于提取 DNA 的组织块的制备和保存
用解剖刀或镊子从子实体上选取色泽较浅且较为干净的组织，用干净的吸水纸包裹后， 放入装有变色硅胶的封口袋中干燥处理。及时更换变色硅胶，获得完全干燥的样品，将其保存在放有少量变色硅胶的自封袋内，并避开高温高湿的环境。
5.5.3 大型真菌子实体的形态鉴定
对标本的宏观和微观形态特征以及化学显色反应进行观察和描述，条件允许的情况下进 行显微镜拍摄或绘图，参照可靠的大型真菌鉴定手册和权威文献的描述，依据形态特征对大 型真菌子实体进行鉴定。
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